产品货号：
WH0209
中文名称：
DNA末端修复/加dA尾试剂（Illumina)
英文名称：
End Repair/dA-Tailing Reagent（Illumina)
产品规格：
24次|96次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是专门针对于illumina高通量测序平台文库构建所优化预混酶模块，能够对超声处理、化学处理、酶处理的片段化双链DNA或小片段DNA的末端进行修复，使DNA双链形成平末端，并分别在片段化DNA两端添加5'-P和3'端dA，所得产物无需纯化，直接用于Fast Ligation Reagent（WH0201-01/02）进行DNA片段的adapter连接。本试剂盒采用一步法反应流程，省去了多步纯化步骤，可对极低DNA样本进行高效、快速末端修复及dA尾添加，操作更加简便，文库转化效率更高。
产品特点：
·单管酶促反应，一步完成双链DNA片段的末端修复、dA添加反应。
·高文库转化效率，DNA样本其实量可低至0.25ng。
产品组成：
保存条件：-25~-15℃保存，避免反复冻融，保质期为一年。
注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项）
1．操作过程请注意避免核酸样品和产物之间的交叉污染。
2．请使用不含RNA酶或DNA酶的枪头、EP管进行试验。
3．试验开始前，请清洁操作台，确保没有RNA酶和DNA酶的污染。
4．进行文库扩增前，请确保PCR仪已经调试好并处于稳定的状态。
5．试验前请仔细阅读说明书，如果需要暂停试验，或者无需立即进行下游试验。可根据说明书推荐将试验产物保存于-20℃并安排后续试验。
推荐使用的其他试剂：
1.Fast Ligation Reagent（WH0201-01/02）
2.Single-Indexed Adapter （Illumina Platforms)（WH0206-01/02/03）
3.NGS Library Amplification Reagent（WH0210-01/02）
操作步骤：
准备开始实验前，了解样本DNA的浓度及Buffer成分至关重要，推荐上样量0.25ng~1μg DNA。我们推荐DNA溶解于以下溶液中：去离子水、Buffer EB或LoTE（0.1×TE）。
1．将10×ERA Buffer和5×ERA Enzyme Mix置于冰上融化，短暂混匀。
2．按下表设置PCR仪程序，热盖温度设置为70℃。
3．取1个的200 μl薄壁管，按下表在冰上配置反应体系。
4.向步骤3的薄壁管中加入10 μl 5×ERA Enzyme Mix，轻柔吸打6-8次混匀，注意不要涡旋。
注：此步骤需要保持在冰浴中进行。
5.将配置好反应体系的薄壁管放入4℃预冷的PCR仪中，并开启步骤2中的程序。
6.当反应程序结束后，将薄壁管从PCR仪中取出并置冰上。
7.立即进入接头连接步骤，为保证连接效率，推荐使用Fast Ligation Reagent（WH0201-01/02）。
相关搜索：DNA末端修复/加dA尾试剂（Illumina)，End Repair/dA-Tailing Reagent（Illumina)
产品特点：
·单管酶促反应，一步完成双链DNA片段的末端修复、dA添加反应。
·高文库转化效率，DNA样本其实量可低至0.25ng。
产品组成：
| 组分 | 24次 | 96次 |
| 5×ERA Enzyme Mix | 240μl | 960 μl |
| 10×ERA Buffer | 120 μl | 480 μl |
| Nuclease-Free ddH2O | 1ml | 4×1ml |
保存条件：-25~-15℃保存，避免反复冻融，保质期为一年。
注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项）
1．操作过程请注意避免核酸样品和产物之间的交叉污染。
2．请使用不含RNA酶或DNA酶的枪头、EP管进行试验。
3．试验开始前，请清洁操作台，确保没有RNA酶和DNA酶的污染。
4．进行文库扩增前，请确保PCR仪已经调试好并处于稳定的状态。
5．试验前请仔细阅读说明书，如果需要暂停试验，或者无需立即进行下游试验。可根据说明书推荐将试验产物保存于-20℃并安排后续试验。
推荐使用的其他试剂：
1.Fast Ligation Reagent（WH0201-01/02）
2.Single-Indexed Adapter （Illumina Platforms)（WH0206-01/02/03）
3.NGS Library Amplification Reagent（WH0210-01/02）
操作步骤：
准备开始实验前，了解样本DNA的浓度及Buffer成分至关重要，推荐上样量0.25ng~1μg DNA。我们推荐DNA溶解于以下溶液中：去离子水、Buffer EB或LoTE（0.1×TE）。
1．将10×ERA Buffer和5×ERA Enzyme Mix置于冰上融化，短暂混匀。
2．按下表设置PCR仪程序，热盖温度设置为70℃。
| 操作步骤 | 温度 | 时间 |
| 1 | 4℃ | 1min |
| 2 | 20℃ | 30min |
| 3 | 65℃ | 30min |
| 4 | 4℃ | 保持温度 |
3．取1个的200 μl薄壁管，按下表在冰上配置反应体系。
| 成分 | 用量 |
| 10×ERA buffer | 5 μl |
| DNA sample | X μl |
| Nuclease-Free ddH2O | （35-X) μl |
| Total | 40 μl |
4.向步骤3的薄壁管中加入10 μl 5×ERA Enzyme Mix，轻柔吸打6-8次混匀，注意不要涡旋。
注：此步骤需要保持在冰浴中进行。
5.将配置好反应体系的薄壁管放入4℃预冷的PCR仪中，并开启步骤2中的程序。
6.当反应程序结束后，将薄壁管从PCR仪中取出并置冰上。
7.立即进入接头连接步骤，为保证连接效率，推荐使用Fast Ligation Reagent（WH0201-01/02）。
相关搜索：DNA末端修复/加dA尾试剂（Illumina)，End Repair/dA-Tailing Reagent（Illumina)